vendredi 5 septembre 2008

travail au labo

Bon, je vais vous présenter l'experience sur laquelle j ai passé le plus de temps et pour 95% de celui ci : totalement seule avec mes pipettes (easy to improve your english^^)
Recovery of astaxanthin with CGA

Pour faire simple, l'astaxanthine, asta pour les intimes, est un carotenoide avec des effets antioxydants. le CGA est signifie : Gaz colloidal aphron, en gros c'est une création de bulles et en fonction de la concentration de CTAB (le surfactant) on a des bulles de tailles differentes (donc avec plus ou moins de surface pour former des micelles avec l'asta : "interfacial area"), et une stabilité differente ce qui va jouer sur le drainage...il faut tenir compte de tous ces parametre...
C'est pas dur, on prépare une solution avec les cellules contenant l'asta et on melange ça avec de la soude pendant 1/2 heure.

Ensuite on attends^^ ou plutot on prépare la pompe et le "mélangeur" (je ne sais pas le traduire en francais) .On prepare aussi la solution de CTAB qui est le surfactant utilise pour créer le CGA, c est a dire des micelles avec l'asta.

Puis on met ça dans le "melangeur" pendant 5 min, pour avoir la création du CGA (c est a dire de la mousse ...)

Ensuite on met le bon volume de la solution d'asta dans la colonne et on lance la pompe (après quelque savants calculs, pour régler la vitesse...afin qu'elle soit optimale et bla bla bla

Des que la mousse rentre en contact avec la solution on démarre le chrono : but mesurer le 'contact time'. meme si d'après mes calculs je sais que ce sera 5 min ... je mesure tout ça à la seconde près!

Ensuite on coupe la pompe et on laisse reposer pendant 5 min le temps d'avoir deux phases distinctes...malheureusement pour moi c'est 5 min en trop pendant lesquelles j'ai le temps de me prendre en photo (et oui à ce momemt la je suis OBLIGEE de porter mes magnifiaqes lunettes...)



je récupère mes 2 phases : la liquid phase et l'aphron phase (pour savoir quel est la masse de chaque phase, j ai préalablement pesé mes bechers avant et je le referai après).

Je prélève 2,5mL de chaque solution et je les dépose sur mes filtres (préalablement préparés 24h a l'avance) dans le buchner. on pèse le filtre avant et après bien sur! et ça nous permet d'étudier la biomasse...passionnant n'est ce pas!





Je récupère des échantillons en 2 exemplaires dans mes épendorphs tubes (1mL a chaque fois) pour d'autres analyses...





Après ça, jai le droit de faire une pause, mais bon, il est 11h, j'ai commence a 9h30...je suis pas trop fatiguée alors on continue (en fait c'est que je n'ai rien d'autre a faire...à par papoter avec mes pipettes, se balader dans les autres labo et papoter avec des vrais personnes (en général des lasalliens^^) ou alors miracle Fisseha fait du lab experiment dans mon labo et là ça peut durer au 1h et oui toujours papotage intensif! )


je vais revenir experte de sujet de conversation : the weather!! oh it's terrible today!!it's rainning (comme si je m'en n'était pas rendue compte...en plus ici c'est rare de pouvoir utiliser son parapluie...)

suite: on centrifuge les tubes épendorphs ceci pendant 10min pour récupérer le surnageant (que l'on met dans un bécher puis dans un four et qu'on analyse le lendemain...)

ensuite on garde les petits épendedorph (il reste toujours une phase solide avec de l'asta qu'on va essayer de récupérer) dans lesquels on met 1ml de DMSO.

vortexer

10 min de bain marie

puis on recommence. On fait ca 3 fois en tout...

On passe le tout à la centrifugeuse : 5min (maximum speed = 14 rpm)

On vide le liquide du dessus dans les volumetrics flask.

et on rajoute de l'acétone dans les ependorphs tubes. on vortex et on remet 5 min à la centrifugeuse et on vide le liquide et on rerecommence....jusqu'à ce que l'on estime que l'on ne peut plus récupérer de l'astaxanthine... (autant dire c'est plus ou moins quand JE veux^^)

on fini par une analyse au spectophotomètre (je le deteste)

On n'oublie pas de tout noter dans le magnifique lab book!

et surtout de faire sa "vaisselle" avant de partir!

ceci est une experience "passionnante"que je peut faire dans mon labo...le plus dur c'est le compte rendu avec résultats, graphes et conclusions (ou pas)^^

merci à ceux qui m'auront lu jusqu'au bout!;)

Lizette

3 commentaires:

Florent a dit…

J'en envie de dire qu'une chose : ET paf, des chocapics!
j'ai touuuut a fait compris ton expérience. (j'ai beacoup aimé le : pour faire simple)

Florent a dit…

Ha oui et autre chose, je crois que "mélangeur" se traduit mixeur en gros comme le mot anglais. <8°/ pourquoi faire simple qd on peut faire compliqué (attention j'ouvre un débat)

Une nouvelle aventure au Quebec a dit…

si seulement ca pouvait donner des chocapics ou des truc qui se mangent au chocolat!!!!!!!!!

le mixeur je ne crois pas que ce soit le bon mot..pke meme Maria ne le connait pas en anglais (ou alors c'est vraiment Big Stirrer^^)

lizette